藥品生產(chǎn)驗證指南（2003）--國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品安全監(jiān)管司
前言：該規(guī)范完整詳細的闡述了藥品生產(chǎn)中的廠房、環(huán)境、用水、設備、原料、制劑等的驗證方法，雖然有些參數(shù)已經(jīng)過時，但仍然對國內(nèi)的藥品生產(chǎn)有著重要的指導意義。北京同林把指南中的臭氧部分摘錄出來，方便大家參考。臭氧消毒分為氣相消毒和液相消毒，該指南中給出了臭氧對空氣、純化水和管道的消毒驗證方法。在現(xiàn)在藥品生產(chǎn)的應用中，臭氧還可以對物料、設備、包材、服裝等物表進行消毒。
 
第二篇 廠房與設施的驗證→第二章 藥品生產(chǎn)環(huán)境的驗證→第四節(jié)環(huán)境消毒方法及效果的驗證→一、潔凈室的消毒措施→(三)主要消毒和滅菌方法
6．臭氧消毒
臭氧(O₃)的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧 (O₂)和單個氧原子(O)，后者具有很強的活性，對細菌有極強的氧化作用，可氧化分解細菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必需的酶，從而破壞其細胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會自行重新結(jié)合成為普遍氧分子(O₂)，不存在任何有害殘留物，故稱無污染消毒劑。臭氧不但對各種細菌(包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌)有極強的殺滅能力，而且對殺死霉菌也很有效。
生產(chǎn)臭氧的原料主要是空氣和電能，一般通過高頻臭氧發(fā)生器(電子消毒器)來獲得。消毒時直接將臭氧發(fā)生器置于房間中即可?？諝庵惺褂贸粞跸镜臐舛群艿?，只有百萬分之幾，可根據(jù)房間體積及臭氧發(fā)生器的臭氧產(chǎn)量來計算得到。
 
第二篇 廠房與設施的驗證→第二章 藥品生產(chǎn)環(huán)境的驗證→第四節(jié)環(huán)境消毒方法及效果的驗證→二、消毒效果的驗證
2．臭氧消毒驗證的要點
臭氧消毒效果的驗證中需確認和校準的臭氧發(fā)生器技術指標主要有臭氧產(chǎn)量、臭氧濃度和時間定時器，并通過很終檢查細菌數(shù)來確定消毒時間。
(北京同林目前除了使用定時器控制臭氧投加量外，更可以通過終端安裝臭氧檢測儀，和臭氧發(fā)生器上的PLC聯(lián)動，智能控制臭氧投加量、投加濃度)
 
附錄2－2 消毒效果驗證實例
【示例2】 潔凈室(區(qū))臭氧消毒的驗證
1．臭氧消毒方法
臭氧消毒一般分為系統(tǒng)消毒及局部消毒，如單個緩沖間、傳遞間等。
(1)通過空氣凈化系統(tǒng)(HVAC)對房間進行消毒根據(jù)潔凈室(區(qū))體積和HVAC 系統(tǒng)的風管體積(或風量)、臭氧殺菌效率選用相應的臭氧發(fā)生器?？蓪⒅鳈C置于空調(diào)系統(tǒng)的總送風管或回風管道的合適位置， 電源控制系統(tǒng)置于機房內(nèi)。消毒時關閉相應的新風進口和回風排放閥門，使整個被消毒的潔凈區(qū)空氣通過凈化系統(tǒng)
風管形成循環(huán)，臭氧發(fā)生器即開始工作。如每日做空氣滅菌，一般可開機1～1.5h；如每周以臭氧代替化學試劑熏蒸對物體表面、墻壁、地面及設備滅菌，一般可開機2～2.5h。其優(yōu)點是：在被消毒的房間里不需增加任何消毒設備， 即可達到規(guī)范標準的要求，保持良好的工作環(huán)境，也可直接安裝在空氣處理設備中，使臭氧發(fā)生器的安裝與維護變得更為簡單和方便。
(2)臭氧發(fā)生器直接放在房間中使用。
2．臭氧發(fā)生器消毒的計算
以選擇合適的臭氧發(fā)生器為前提，設潔凈室(區(qū))體積為V1，HVAC 系統(tǒng)風管容積為 V2，V3 為保持潔凈區(qū)正壓所補充的新風的臭氧消耗量。
則消毒空間體積為：
V＝ V1+ V2+V3
式中V3 的確定根據(jù)消毒實踐， 歸納出較為可靠的經(jīng)驗公式如下：
V＝HVAC 系統(tǒng)循環(huán)總風量(m3／h)×25％(假定新風補充量為25％)×10％(保持潔凈區(qū)正壓需補充的新風量)×37.75％(計算應用臭氧半衰率的預算值)
即： V≈循環(huán)系統(tǒng)總風量×0.944％
3．臭氧發(fā)生器的選擇
先按臭氧滅菌的效率和《消毒技術規(guī)范》的標準決定臭氧滅菌的濃度(C)：對空氣中浮游菌，臭氧滅菌濃度為(2～4)×10^－6；對物體表面的沉降菌，為(10～15)×10^－6 (臭氧滅菌濃度參考衛(wèi)生部1991年12月頒布的《消毒技術規(guī)范》)。臭氧的半自然半衰期(S)參比狀態(tài)下為20min 左右；1h 的衰退率約為62.25％；設計、應用臭氧滅菌60min 達到相對濃度后，繼續(xù)保持一段時間 (1～1.5h)， 即可達到對機器設備和建筑物體表面沉降菌殺滅的目的。
例如，消毒空間體積(V)為600m³，要求殺滅設備和建筑物表面沉降菌。按照上述要求空氣中臭氧濃度(C)應達到為10×10^－6，折算為19.63mg/m³。臭氧發(fā)生器在工作1h后臭氧自然衰退率(S)為62.25％，則選擇臭氧發(fā)生器的臭氧發(fā)生量
   
（北京同林臭氧專家提示：目前很新的《消毒技術規(guī)范》為2002版，有很新的消毒濃度規(guī)定。這里對臭氧的半衰期計算也不準確。北京同林在實際GMP車間的臭氧應用中發(fā)現(xiàn)，HVAC系統(tǒng)中的過濾系統(tǒng)會臭氧有很大的破壞作用，另外，新風變量會引起二次驗證的問題。這里的計算公式不準確僅供參考，實際投加量根據(jù)實際情況會更準確。不過該指南是2003年頒布的，15年過去了，也該更新啦）
 
第二篇 廠房與設施的驗證→第三章純化水、注射用水(清潔蒸汽)系統(tǒng)的驗證→第三節(jié) 純化水、注射用水系統(tǒng)→二、水的凈化技術
純化水的制備是以原水(如飲用水、自來水、地下水或地表水)為原料，經(jīng)逐級提純水質(zhì)，使之符合要求的過程，然后再通過蒸餾等方法獲得注射用水。因此水的凈化是一個多級過程，每一級都除掉一定量的污物，為下一級做準備。對某一獨特的水源，應根據(jù)其水質(zhì)特性及供水對象來設計凈化系統(tǒng)。純化水系統(tǒng)的設計及建造必須考慮到原水的水質(zhì)、原水中常見污染物的特點及對生產(chǎn)的影響。例如：水源中有機物質(zhì)含量和濃度較高，需加強凝聚、活性炭處理、過濾及澄清等預處理；水源中硬度高，需要增加軟化工序。就脫鹽工序來說，可以用電滲析(ED)、反滲透(RO)和離子交換樹脂除鹽，也可以用三者的不同組合來脫鹽，要視水中含
鹽量的多少而定。若原水中的可溶性鹽(TDS)含量很低，在預處理后可以直接使用離子交換樹脂系統(tǒng)而不必用電滲析或反滲透。對含二氧化碳高的原水還需采用脫氣裝置。對含有機物高的原水需采用大孔樹脂或活性炭處理。對含細菌多的原水需采用加氯或紫外燈或臭氧殺菌。
對顆粒的截留可采用各種膜過濾或超過濾技術。
純化水的制備通常由前處理、脫鹽和后處理三大部分組成。
1.前處理
前處理有物理方法、化學方法和電化學等方法。其中物理方法有澄清、砂濾、脫氣、膜過濾、活性炭吸附等；化學方法有混凝、加藥殺菌、消毒、氧化—還原、絡合、離子交換等；
電化學方法有電凝聚等。以去除原水中的懸浮物、膠體、微生物等為主，并消除過高的硬度和濁度。
2.脫鹽
脫鹽工序有有電滲析、反滲透、離子交換等。近年來電再生混合床(EDl)技術得到了飛速發(fā)展，可取代傳統(tǒng)的離子交換法，該方法無需酸、堿再生，其離子交換樹脂的再生依靠電壓。
3.后處理
后處理(精處理)是脫鹽以后水質(zhì)處理的統(tǒng)稱。一般包括用終端離子交換去除離子痕菌、臭氧殺菌、超過濾、微孔過濾等。
(十)水系統(tǒng)的消毒
制藥用水系統(tǒng)中，微生物的控制是通過對水處理設備和分配系統(tǒng)管道的消毒滅菌來達到的，目的是將出水中的微生物數(shù)量控制在標準之內(nèi)。通常純化水的設備和管道消毒方法有巴氏消毒、紫外線消毒、臭氧消毒、蒸汽消毒等，注射用水的分配系統(tǒng)主要是純蒸汽消毒。
1．巴氏消毒器
巴氏消毒器所采用的設備較簡單，通常使用熱交換器，以蒸汽或電加熱作為熱源，消毒的介質(zhì)則是系統(tǒng)中的純化水本身；也可以直接將貯罐中的純化水加熱(通過夾套)作為消毒器。
水溫應控制在80℃以上，開啟水泵循環(huán)沖刷水處理設備和管道。
2，臭氧消毒器
利用臭氧發(fā)生器產(chǎn)生的臭氧直接對水系統(tǒng)進行消毒，也可制作臭氧水對儲水罐等進行消毒。
第四篇制劑生產(chǎn)驗證→第三章大容量注射劑的驗證→第二節(jié) 廠房及公用工程系統(tǒng)→二、純化水及注射用水系統(tǒng)
4．控制微生物的特殊措施
巴氏消毒、臭氧及紫外燈組合往往是比較合理的設計方案。巴氏消毒雖不能將芽孢殺滅，但對生長態(tài)菌而言是非常有效的。臭氧消毒也是一個控制微生物污染的有效手段，但在生產(chǎn)使用前應用紫外燈將其破壞，以消除其對產(chǎn)品可能的氧化作用。
(北京同林臭氧專家表示：特定波長的UV紫外燈可以破壞水中殘余臭氧，防止其氧化性對生產(chǎn)物料產(chǎn)生氧化作用。見臭氧的副作用)